مبادئ مجموعات ELISA
Jun 30, 2019
يكمن أساس تقنية المقايسة المناعية في تفاعل الارتباط المحدد بين الأجسام المضادة للمستضد، لذلك لا يمكن فصل أي كواشف تشخيصية عالية الجودة- عن المواد الخام عالية الجودة-، مثل الأجسام المضادة للمستضد والإنزيمات وما إلى ذلك. المستضدات المستخدمة سابقًا في المقايسة المناعية هي عادةً مستضدات منقاة، في حين أن الأجسام المضادة هي أجسام مضادة وحيدة النسيلة يتم الحصول عليها بعد تنقية الحيوانات المناعية للمستضد والأجسام المضادة وحيدة النسيلة التي يتم الحصول عليها باستخدام تقنيات الأورام الهجينة، في حين أن المستضدات أو علامات الأجسام المضادة مثل يتم تحضير الارتباطات الموسومة بالإنزيم - من خلال طرق التخليق الكيميائي المختلفة.
في السنوات الأخيرة، مع تطور البيولوجيا الجزيئية، أصبح استخدام أساليب الهندسة الوراثية لإعداد مجموعة متنوعة من المستضدات الخاصة أو الأجسام المضادة وارتباطاتها الإنزيمية وكواشف المقايسة المناعية الأخرى جيلًا جديدًا من الكواشف، كما ظهرت أيضًا مجموعة متنوعة من الاستخدامات الجديدة لطرق المقايسة. خصائص كاشف HBsAg (وضع الكشف: طريقة شطيرة الأجسام المضادة السريرية): الحزمة عبارة عن جسم مضاد لمقاومة الماعز المتعددة-. تتمتع مقاومة Poly- بتقارب عالٍ ومقاومة تفاعلية للجدول الأصلي. الأجسام المضادة السطحية الإنزيمية عبارة عن وحدات مركبة من الفئران ذات مواقع ربط مختلفة مع HBsAg، ويمكن قياس عينات HBsAg المتغيرة، وتحسين خصوصية الكشف (99.98٪) لتحسين حساسية الكشف، وتطبيق نظرية Parl Ehrich (PEI) HBsAg القياسية، والحساسية لمعيار الإعلان الابن 0.05 نانوغرام /
تبلغ حساسية ml للمنتجات القياسية 0.025 نانوغرام/مل من تطبيق مجموعة اختبار ELISA، وهي تقنية اختبار مناعي نوعي، مع حزمة مستضد الببتيد HEV الاصطناعي بواسطة شرائح صفيحة مسامية صغيرة -، هذه الببتيدات هي تسلسل الأحماض الأمينية الأساسية لسلالة HEV الصينية من شرائح الببتيد ذات المستضد العالي، على التوالي، من سلالات صندوق القراءة المفتوح 2 وصندوق القراءة المفتوح 3. تتم إضافة العينة أو المنتج القياسي إلى الحفرة واحتضانها، إذا كانت هناك أجسام مضادة لـ HEV IgM، فإن هذه الأجسام المضادة سترتبط بمستضدات HEV polypeptide ويتم تثبيتها فوقها لإزالة الأجسام المضادة غير المحددة الأخرى والمكونات الأخرى في العينة. ثم أضف رابط إنزيم الأغنام المضاد -IgM-HRP (بيروكسيداز الجذر الحار)، بعد الحضانة الثانية، سيتم دمج رابط الإنزيم مع الجسم المضاد الأول لـ HEV IgM المرتبط بالحضانة، وغسل اللوحة لإزالة ارتباط الإنزيم غير المدمج، وإضافة محلول ركيزة TMB، في الحضانة الثالثة سيحدث تفاعل سفلي للإنزيم -، فقط تلك الثقوب في المركب التي تحتوي على أجسام مضادة لـ HEV IgM وروابط الإنزيمات ستتغير اللون، أضف محلول حمض الكبريتيك لإنهاء التفاعل بين الإنزيم والركيزة، وقياس قيمة OD عند 450 نانومتر، وفقًا لمعيار الاختبار لمجموعة إليزا للجسم المضاد HEV IgM، O. العينات ذات قيم D أكبر من أو تساوي قيم القطع-تعتبر قيم القطع إيجابية في الاختبار الأول.

